線粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm)試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：線粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm)試劑盒紫外分光光度法
貨號：LZ-S01144-A
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類：三羧酸循環(huán)系列
發(fā)貨地：上海
測定意義:
CDHm（EC 1.1.1.41）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中，在三羧酸循中催化異檸檬酸生成α-酮戊二酸，同時將NAD+ 還原為NADH，是三羧酸循環(huán)的限速酶之一，其催化的反應(yīng)是細胞NADH主要來源之一。
測定原理:
ICDHm催化NAD+ 還原生成NADH，導致340nm處光吸收上升。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一：50mL×1 瓶，-20℃保存；
試劑二：10mL×1 瓶，-20℃保存；
試劑三：1mL×1 支，-20℃保存；
試劑四：液體 60mL×1 瓶，4℃保存；
試劑五：粉劑×1 支，4℃保存；
試劑六：粉劑×1 支，-20℃保存；
試劑七：粉劑×1 支，-20℃保存; 臨用前加入 3mL 蒸餾水充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
工作液的配制：臨用前把試劑五、試劑六轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
樣本的前處理：
組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：
1、 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細菌或細胞，加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
2、 將勻漿 600g，4℃離心 5min。
3、 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心 10min。
4、 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的 ICDHm（此步可選做）。
5、 在步驟④的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或200W，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復 30 次），用于線粒體 ICDHm 活性測定。
生化檢測試劑盒操作步驟：
一、?準備工具和環(huán)境?：確保操作臺面干凈、整潔，這是進行科學實驗的步。
?二、?仔細閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?：按照說明書的指導，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。杭州
?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個時間可以用來進行其他活動，但不要著急，因為好的結(jié)果值得等待。
六、結(jié)果判讀?：時間到后，仔細判讀結(jié)果。試劑盒通常會有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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產(chǎn)品名：胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基
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3200元
產(chǎn)品名：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)基