兔骨髓單核細(xì)胞
基本屬性:
細(xì)胞名稱:兔骨髓單核細(xì)胞
組織來源:骨髓
商品貨號:LZ-YX10461
種屬來源:兔
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介:
兔骨髓單核細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,近也有采用磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。
培養(yǎng)基:含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):巨噬細(xì)胞樣
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
兔骨髓單核細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈巨噬細(xì)胞樣,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞不增殖;不傳代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養(yǎng)基(補(bǔ)加1%FBS,促進(jìn)貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
原代細(xì)胞試用的實(shí)驗(yàn)類型:
上海前面我們了解了原代細(xì)胞獲取和培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意的一些細(xì)節(jié),這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細(xì)胞。那么原代細(xì)胞培養(yǎng)好后,它可適用哪些研究呢?
原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應(yīng)用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎(chǔ)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),如下:
一、細(xì)胞增殖檢測:
常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細(xì)胞周期檢測
兔骨髓單核細(xì)胞品牌常見檢測方法:流式檢測細(xì)胞周期,標(biāo)記有絲分裂百分率法
三、細(xì)胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細(xì)胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力檢測
兔骨髓單核細(xì)胞規(guī)格常見檢測方法:細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn),Transwell實(shí)驗(yàn),Invasion實(shí)驗(yàn)
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP2 ELISA Kit
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正常大鼠(SpragueDawley)腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
MouseAi-myocardialaibody,AMAELISAKit小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標(biāo)簽) Protein
P311 protein 增生性瘢痕相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgP311 protein 增生性瘢痕相關(guān)蛋白(抗原)
BCHE重組人 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CAPG Protein Human 重組人 CAPG / AFCP 蛋白
FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
兔骨髓單核細(xì)胞P311 protein 增生性瘢痕相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgP311 protein 增生性瘢痕相關(guān)蛋白(抗原)
CAPG Protein Human 重組人 CAPG / AFCP 蛋白
DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標(biāo)簽) Protein
FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BCHE重組人 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
所屬分類:校園實(shí)驗(yàn)室設(shè)備/實(shí)驗(yàn)試劑
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