產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱：解沒食子酸鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Streptococcus gallolyticus

產(chǎn)品貨號：LZ-P4068

規(guī)格：50T

分類：PCR檢測試劑盒

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光。

有效期：一年

如何進(jìn)行 PCR 實(shí)驗(yàn)？

一、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料（1）DNA模板：包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海（2）引物：短的單鏈DNA片段，用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一種酶，用于合成DNA。（4）四種脫氧核苷酸（dNTPs）：DNA的構(gòu)建塊。（5）緩沖液：提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。（6）鎂離子或其它必需的離子：通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中?；旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。

1. 3. PCR程序（1）將混合物放入PCR機(jī)（熱循環(huán)儀）中，并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段：（2）初次變性：加熱至94-98°C，持續(xù)幾分鐘，使DNA雙鏈解開成單鏈。（3）循環(huán)步驟（通常進(jìn)行30-40次循環(huán)）：（4）變性階段：加熱至94-98°C，持續(xù)20-30秒，使DNA雙鏈解開。（5）退火階段：降溫至50-65°C，持續(xù)20-40秒，允許引物與模板DNA結(jié)合。（6）延伸階段：加熱至72°C，持續(xù)1分鐘每1千個(gè)堿基，以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。（7）后延伸：在72°C下持續(xù)5-10分鐘，確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。（8）保持階段：將溫度降至4-15°C，直到用戶準(zhǔn)備取出樣品。

實(shí)驗(yàn)步驟：

一．解沒食子酸鏈球菌樣品制備

1．PCR擴(kuò)增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測，上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。

2．PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液（變性緩沖液，同《分子克隆》中的測序緩沖液），然后在緩沖液中央加入PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗(yàn)，擴(kuò)增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就適當(dāng)增加1.5、2或3不等，同時(shí)加大上樣緩沖液的量，比如加3ul的PCR產(chǎn)物，緩沖液加到8ul變性效果更好。

3．PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心，使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘，立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min，以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。

PCR實(shí)驗(yàn)的基本步驟：

DNA聚合酶是實(shí)驗(yàn)室中常用的生物學(xué)酶之一，在PCR實(shí)驗(yàn)中具有重要的作用。實(shí)驗(yàn)室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。

一Taq聚合酶：

Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶，在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性，可以在高溫條件下保持活性，這是由于其來源于熱液生物，能夠存活和正常活動于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈，因此在PCR中用于擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此，在某些應(yīng)用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。

二、解沒食子酸鏈球菌試劑Pfu聚合酶：

Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色，其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外，Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性，可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。因此，Pfu聚合酶適用于需要高度準(zhǔn)確的PCR擴(kuò)增和DNA測序。

三、Tth聚合酶：

Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性，可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此，Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）中得到廣泛應(yīng)用，用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，并通過增加熱活性酶來實(shí)現(xiàn)PCR擴(kuò)增。此外，Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性，可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。

胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基

溴化乙啶組織染色法端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒

αSMA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

TRAIL 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

10倍蔗糖核酸電泳上樣緩沖液

血液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒

ZENKER固著液

組織對氧酶3（PON3）活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞BMK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

血液乙酰酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒

組織科薩基病毒A（Coxsackievirus A）定性檢測試劑盒

豆制品維生素U（S-methionine）比色法定量檢測試劑盒

真核翻譯起始因子2C3抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體

0酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體

1號染色體開放閱讀框74抗體

周期2抗體

DNA連接酶4抗體

RNA結(jié)合蛋白9抗體

G蛋白偶聯(lián)受體100抗體

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

解沒食子酸鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒鉀/超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白2抗體

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  甲基檸檬酸合酶(MCS）試劑盒可見分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：甲基檸檬酸合酶,可見分光光度法,試劑盒

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  乙酰輔酶A試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒

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  脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  線粒體檸檬酸(MCA）含量試劑盒紫外分光光度法

  975元

  產(chǎn)品名：線粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒

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  ?；D(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒可見分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：?；D(zhuǎn)移酶,可見分光光度法,試劑盒

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  可溶性淀粉合成酶(SSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：可溶性淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：結(jié)合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  NO含量試劑盒微量法

  253.5元

  產(chǎn)品名：NO含量,微量法,試劑盒