PCR檢測試劑盒有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)?shù)膬Υ鏈囟认?。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。上海

產(chǎn)品名稱：番鴨細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Muscovy Duck Parvovirus(MDPV)

產(chǎn)品貨號：LZ-P3782

分類：PCR檢測試劑盒

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.  陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct；

2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無效。

【結(jié)果判斷】

1.  番鴨細(xì)小病毒PCR陽性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；

3.   陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合；

　　　②堿基配對原則；

　　?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

　　?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。

番鴨細(xì)小病毒試劑其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2)靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR檢測步驟:

1、樣品處理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取樣品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注：也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷卻至室溫，吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液，充分融化，短暫離心，然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中，蓋好管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測熒光信號，檢測通道選擇FAM。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人鐵蛋白(FE)ELISA

豬白介素4(IL-4)試劑盒 Porcine ierleukin 4,IL-4 ELISA Kit

HumanE-Cadherin,E-CadELISAKit 人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)PCR檢測試劑盒

HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPPCR檢測試劑盒人骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)PCR檢測試劑盒

ELISAKitOXR豬食欲素受體規(guī)格：48T/96T

HumanEpidermalgrowthfactor，EGFELISAKit人表皮生長因子(EGF)PCR檢測試劑盒

人白介素10(IL-10)ELISA

兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 Rabbit soluble Vascular cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit

神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(G3)PCR檢測試劑盒 ， G3 ELISA Kit

PorcineInsulin,INSPCR檢測試劑盒豬(INS)PCR檢測試劑盒

HumanAdenosinediphosphate,ADPPCR檢測試劑盒人二0酸腺苷(ADP)PCR檢測試劑盒

Humanai-spermaibody，AsAbELISAKit人抗抗體(AsAb)PCR檢測試劑盒

番鴨細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒SAMD9： SAMD9蛋白抗體 0.2ml

phospho-EphB1 (Tyr928)： 0酸化酪酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml

細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體 Anti-AATK 0.1ml

Anti-Wnt3a/FITC 熒光素標(biāo)記信號通路Wnt3a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO3a (Ser253) 0酸化叉頭蛋白3A抗體 規(guī)格 0.1ml

CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型尿肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

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  甲基檸檬酸合酶(MCS）試劑盒可見分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：甲基檸檬酸合酶,可見分光光度法,試劑盒

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  脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  線粒體檸檬酸(MCA）含量試劑盒紫外分光光度法

  975元

  產(chǎn)品名：線粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒

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  乙酰輔酶A試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒

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  ?；D(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒可見分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：?；D(zhuǎn)移酶,可見分光光度法,試劑盒

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  可溶性淀粉合成酶(SSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：可溶性淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：結(jié)合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

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  NO含量試劑盒可見分光光度法

  200元

  產(chǎn)品名：NO含量,可見分光光度法,試劑盒