PCR實驗室平面布局設計要點分析


1、平面功能分區(qū)要點分析


根據(jù)《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增分析區(qū)4個區(qū)域組成。


2、實驗室功能與設備設計要點分析

(1)試劑儲備區(qū)


該區(qū)域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區(qū)域的試劑和材料不應經(jīng)過其他區(qū)域，試劑和原材料應在本區(qū)內儲存和制備。本區(qū)域的氣壓應相對外界保持正壓。該區(qū)域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動紫外燈等。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全”應是平面設計首要考慮因素，平面設計時應保持通風流暢、逃生暢通。，實驗臺布置在房間的兩側，中間的過道全部通向走廊便于疏散。同時根據(jù)國際人體工程學的標準，實驗臺與實驗臺通道設計為1500mm，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求。


(2)標本制備區(qū)


該區(qū)域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內，不得經(jīng)過其他區(qū)域。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染，本區(qū)應對外界保持負壓;同時本區(qū)相對于擴增反應混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。


該區(qū)域的設備主要是生物安全柜、加樣器、臺式高速離心機、臺式低速離心機、水浴鍋、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。其中需要注意的是，生物安全柜好選用B2型，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經(jīng)過過濾器過濾后排到室外，不再進入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內反復循環(huán)，造成標本之間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽性結果。


(3)擴增區(qū)


該區(qū)域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液和已制備的DNA模板(來自標本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內進行。對于氣流壓力的控制，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。


該區(qū)域的設備主要是核酸擴增熱循環(huán)儀、加樣器、超凈臺等。其中熱循環(huán)儀的電源應，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。


(4)分析區(qū)


該區(qū)域的功能是擴增產(chǎn)物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實驗的后一步，壓力應為低，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。


該區(qū)域的設備主要是加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。

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